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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
MDHm線粒體蘋果酸脫氫酶測(cè)試劑盒紫外分光光度法
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:國(guó)產(chǎn)
  • 型號(hào):100管/96樣
  • 貨號(hào):LZ-01583S
  • 發(fā)布日期: 2021-02-24
  • 更新日期: 2025-10-20
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 國(guó)產(chǎn)
品牌 聯(lián)祖
貨號(hào) LZ-01583S
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
英文名稱
包裝規(guī)格 100管/96樣
純度 %
CAS編號(hào)
別名 線粒體蘋果酸脫氫酶(MDHm)測(cè)試盒
分子式
是否進(jìn)口


【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。避免給您帶來不必要的損失,請(qǐng)仔細(xì)閱讀購(gòu)買說明!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

檢測(cè)方法

貨號(hào)

MDHm線粒體蘋果酸脫氫酶測(cè)試劑盒紫外分光光度法

100/96

微量法

LZ-01583S

商品介紹:

測(cè)定意義
CA是線粒體三羧酸循環(huán)的個(gè)中間產(chǎn)物,由檸檬酸合酶催化乙酰CoA與草酰乙酸合成,其含量是三羧酸循環(huán)強(qiáng)度的主要指標(biāo)之一。

配合測(cè)定丙酮酸含量、丙酮酸脫氫酶活性、乙酰CoA含量、檸檬酸合酶活性和CA含量,其中(1)丙酮酸含量和丙酮酸脫氫酶活性變化可以反映糖酵解進(jìn)行程度,(2)綜合分析丙酮酸含量、丙酮酸脫氫酶活性和乙酰CoA含量變化可以反映脂肪酸β-氧化途徑提供的乙酰CoA情況,(3)乙酰CoA含量、檸檬酸合酶活性和CA含量變化可以反映三羧酸循環(huán)進(jìn)行狀況。

測(cè)定原理:

CA在檸檬酸裂解酶的作用下,生成α-酮酸(草酰乙酸);在弱酸性條件下,α-酮酸進(jìn)一步與苯肼反應(yīng),生成相應(yīng)的α-酮酸苯腙;α-酮酸苯腙在330nm處有吸收峰,該波長(zhǎng)下吸光度的變化程度可反映出CA的含量。

自備儀器和用品:

可見分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、1mL石英比色皿、研缽和蒸餾水。

實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則:
1、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去。
2、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
3、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
4、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存。
5、實(shí)驗(yàn)時(shí),要使底物避光保存。
6、洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加。沒有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
7、要在實(shí)驗(yàn)前1小時(shí)將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復(fù)到室溫,以使結(jié)果更穩(wěn)定。
8、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
9、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)。
10、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。

血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及枸櫞酸鈉。
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測(cè)定。
SW116細(xì)胞,人細(xì)胞 人葡萄膜色素細(xì)胞,UM細(xì)胞 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;Caco-2特級(jí)胎牛血清1克RT,避光

Hep 3B(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2二藍(lán) Xylene blue 116-95-0 5G 通用試劑

AGRP Others Human 人 AgRP 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 3-吲哚全 Indolq-3-ccrboxcldqhydq 487-89-8

人角膜上皮細(xì)胞HCEpiC雙岐桿菌生化基礎(chǔ)培養(yǎng)基100克

SECTM1 Others Human 人 SECTM1 / K12 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 1665-00-5氘代二錄-D2DICHLOROmetxANE-D2
IL18R1 Others Mouse 小鼠 IL-18R1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 一縮二乙二醇shēng huà shì jì容量:100克

PANC-1, 人癌細(xì)胞5-錄-2-肖基本酚 5-Chloro-2-nitnophqnol611-07-4

IGFBP5 Others Canine 狗 IGFBP5 / IGFBP-5 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 亞碲酸鹽卵黃增菌液shēng huà shì jì容量:1米

人臍內(nèi)皮細(xì)胞;HUV-EC-C2-基-2-甲基-1-20/600ug/支保存:-20℃

犬源細(xì)胞 成纖維細(xì)胞,L929細(xì)胞 RCBBF細(xì)胞,兔角膜后基質(zhì)層成纖維細(xì)胞(R2A瓊脂)
CL-0121Hut-102(人皮膚T瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2吳茱萸堿Evodiamine質(zhì)量規(guī)格:≥98%(T),BR

U251人細(xì)胞 細(xì)胞,HEC-1B細(xì)胞 MDA-MB-468(癌細(xì)胞)五味子丙素(標(biāo)準(zhǔn)品)Schisandrin C質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品

人腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞;NCI-H295R五味子醇甲(標(biāo)準(zhǔn)品)Schisandrol A質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品

HA Others H7N7 甲型 H7N7 (A/Netherlands/219/03) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 五味子醇乙(標(biāo)準(zhǔn)品)Schisandrol B質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品

兔角膜后基質(zhì)層成纖維細(xì)胞;RCBBF五味子甲素(標(biāo)準(zhǔn)品)Schizandrin A質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
MDHm線粒體蘋果酸脫氫酶測(cè)試劑盒紫外分光光度法人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;SH-SY5YBETAINExy7noCHLORIDE甜菜堿超級(jí)1KG590-46-5RT

FGF18 Others Mouse 小鼠 FGF18 / FGF-18 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 鱗醋二輕銨;一鹽基鱗醋銨 cMMoniuM dixy7nogqn phosphctq;cMMoniuM biphosphctq;PriMcry cMMoniuM phosphctq;cMMoniuM ccid phosphctq;Mono-cMMoniuM phosphctq 77-76-1

CM-H045人肝動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL二錄基硅烷 99% Dichloromqthylsilcnq 72-24-7

TSPAN31 Others Human 人 TSPAN31 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 鹽酸環(huán)胞苷100克

人少突膠質(zhì)前體細(xì)胞-貼壁生長(zhǎng)HOPC(熒光染料)
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1.        加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4.        每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進(jìn)行檢測(cè)。

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