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上海聯祖生物科技有限公司
產品展廳
貓源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒規格
  • 品牌:聯祖
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:LZR4302
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發布日期: 2020-11-20
  • 更新日期: 2025-10-20
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 聯祖
貨號 LZR4302
用途 公司產品僅用于科研
包裝規格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

產品名稱

規格

貨號

貓源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒規格

50T

LZR4302

PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環步驟

溫度

時間

循環數

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產品:

Sinomonas拉丁屬名: Sinomonas  susongensis sp. nov.

慢生根瘤菌拉丁屬名: Bradyrhizobium sp.    

黃青霉注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

副球菌拉丁屬名: Paracoccus sp.

大腸埃希氏菌拉丁屬名: Escherichia  coli

香菇用途: 栽培

假單胞菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

大毛霉拉丁屬名: Mucor mucedo (Linnaeus) Fresenius

網孢麻孢菌拉丁屬名: Gelasinospora reticulata

橙蓋傘注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

中國油脂酵母拉丁屬名: Lipomyces chinensis

釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae

淡紫擬青霉注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

葡萄座腔菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

卵孢白僵菌用途: 生物防治
貓源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒規格CHCHD8 英文名稱: 卷曲螺旋結構域蛋白CHCHD8 0.2ml

Anti-CD71/TFR 轉鐵蛋白受體Multi-class antibodies規格: 0.1ml

CD147/EMMPRIN(Extracellular matrix metalloproteinase inducer) CD147(抗原)Multi-class antibodies規格: 0.5mg

Anti-CCL12/MCP5 單核細胞趨化蛋白5Multi-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh PCDHA2 原鈣粘附蛋白α2 規格 0.2ml

CD3D Kit Human 人 CD3d / CD3 delta ELISA配對 ELISA

TM7SF2 英文名稱: 脫氫膽固醇還原酶14 0.2ml

CD68 英文名稱: CD68 0.1ml

Anti-NFKB p65 細胞核因子/k基因結合核因子Multi-class antibodies規格: 0.1ml

EMP(Human erythrocyte membrane protein) ELISA Kit 人紅細胞膜蛋白Multi-class antibodies規格: 48T

Anti-Parvalbumin 細小清蛋白Multi-class antibodies規格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh HAUSP/USP7 病毒相關泛素特異性蛋白酶7 規格 0.2ml

FRA(Human fibronection related antigen) ELISA Kit 人纖維連接素相關抗原 96T

Phospho-PDPK1(Ser393) 英文名稱: 磷酸化3磷酸肌醇依賴性蛋白激酶1 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-CREB-1(Ser121) 磷酸化CREB-1 規格 0.1ml

流式用破膜劑 50T Invitrogen原裝

ZIC3 英文名稱: 內臟異位相關蛋白/鋅指蛋白203 0.2ml

DUSP6 英文名稱: 雙特異性蛋白磷酸酶6/原活化蛋白激酶磷酸酶3 0.2ml

SERPINF2 SerpinF2 鼠單抗 (FITC) Human

Ep300 英文名稱: CREB結合蛋白p300 0.1ml

早老素蛋白-1 Anti-PS-1 0.2ml

Cullin 英文名稱: CULLIN 0.2ml

Anti-Nadrin DysbindinMulti-class antibodies規格: 0.2ml

UPAR 大鼠尿激酶樣纖溶酶原活化物受體Multi-class antibodies規格: 48T

Anti-Dynamin 2 酶動力蛋白2Multi-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh NAP1L1 核小體組裝蛋白1 規格 0.2ml

Human terminal complement complex C5b-9,TCC C5b-9 ELISA Kit 人末端補體復合物C5b-9 96T

SIRT6 英文名稱: 沉默調節相關蛋白6 0.2ml

 


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